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双荧光素酶报告系统(Dual-luciferase reporter system)
利用荧光素酶与底物结合发生化学发光发光反应的特性,把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的上游,构成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素
瞬时转染(Transient transfection)
瞬时转染(transient transfection)是指将DNA导入真核细胞的方式之一。在瞬时转染中,重组DNA导入感染性强的细胞系以获得目的基因暂时但高水平的表达。转染的DNA不必整合到宿主染色体,可在比稳定转染较短时间内收获转染的细
稳转细胞株构建
外源基因在细胞中表达可分为两大类,一类是瞬时表达,一类是稳定表达(**表达)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,虽然可以达到高水平的水平,但通常只持续几天。后者外源DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因。建立稳
透射电镜(transmission electron microscope,TEM)
1932年Ruska发明了以电子束为光源的透射电子显微镜,电子显微镜与光学显微镜的成像原理基本一样,所不同的是前者用电子束作光源,用电磁场作透镜。另外,由于电子束的穿透力很弱,因此用于电镜的标本须制成厚度约50nm左右的超薄切片。目前TEM
成骨诱导
成骨诱导,是指来自植床周边宿主结缔组织中的可诱导成骨前体细胞,在诱导因子的作用下可被诱导定向产生骨原细胞、成骨细胞。