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透射电镜(transmission electron microscope,TEM)
来源: | 作者:1 | 发布时间: 2025天前 | 924 次浏览 | 🔊 点击朗读正文 ❚❚ | 分享到:
1932年Ruska发明了以电子束为光源的透射电子显微镜,电子显微镜与光学显微镜的成像原理基本一样,所不同的是前者用电子束作光源,用电磁场作透镜。另外,由于电子束的穿透力很弱,因此用于电镜的标本须制成厚度约50nm左右的超薄切片。目前TEM的分辨力可达0.2nm。

背景知识:

1932Ruska发明了以电子束为光源的透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM),电子显微镜与光学显微镜的成像原理基本一样,所不同的是前者用电子束作光源,用电磁场作透镜。另外,由于电子束的穿透力很弱,因此用于电镜的标本须制成厚度约50nm左右的超薄切片。目前TEM的分辨力可达0.2nm

透射电镜在生物学的主要应用

1、细胞学

由于超薄切片技术的出现和发展,人类利用透射电镜对细胞进行了更深入的研究,观察到了过去无法看清楚的细胞超微结构。例如,用透射电镜观察线粒体,自噬小体等。

2、发现和识别病毒

许多病毒,尤其是肿瘤病毒就是用透射电镜发现的。透射电镜也为病毒的分类提供了直观的依据,例如SARS病毒就是首先在透射电镜下观察到并确认是病毒而不是支原体的。

3、临床病理诊断

生物体发生疾病都会导致细胞发生形态和功能上的改变,通过对病变区细胞的透射电镜观察就可以为疾病诊断提供有力依据。例如目前透射电镜在肾活检、肿瘤诊治中发挥了重要作用。

4、免疫学

电镜技术与生命科学中新兴起的技术相结合,促进了新技术的应用。例如电镜技术与免疫学技术相结合产生了免疫电镜技术,它可以对细胞表面及细胞内部的抗原进行定位,可以了解抗体合成过程中免疫球蛋白的分布情况等。

样品准备:

取材固定:新鲜组织确定取材部位,尽量减小牵拉、挫伤与挤压等机械损伤,1-3min内取样,组织块面积不超过3mm2,用PBS轻轻漂洗将样本表面的血污,毛发等去掉,保护好需要扫描的面并做好标记(如在对面进行剪角处理)。迅速投入电镜固定液室温固定2h,再转移至保存。

贴壁细胞:弃培养基,收集于EP管中,用PBS轻轻漂洗后,弃PBS加电镜固定液室温固定2h,再转移至保存。

客户提供 :

人(动物)组织或细胞,观察视野部位及相关参考文献。

*终交付:

电镜图片,实验报告单。

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