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稳转细胞株构建
来源: | 作者:1 | 发布时间: 2025天前 | 1023 次浏览 | 🔊 点击朗读正文 ❚❚ ▶ | 分享到:
外源基因在细胞中表达可分为两大类，一类是瞬时表达，一类是稳定表达（**表达）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中，虽然可以达到高水平的水平，但通常只持续几天。后者外源DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的基因。建立稳定细胞株，一般是根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物对靶细胞进行筛选。

工作原理：

外源基因在细胞中表达可分为两大类，一类是瞬时表达，一类是稳定表达（**表达）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中，虽然可以达到高水平的水平，但通常只持续几天。后者外源DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的基因。建立稳定细胞株，一般是根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物对靶细胞进行筛选。

稳转细胞细胞株包括多克隆稳转细胞株和单克隆稳转细胞株。慢病毒感染目的细胞后，通过抗性筛选得到的细胞株是多个细胞克隆的组合。单克隆细胞株是从多克隆细胞中经细胞克隆挑选得到的，由一个细胞扩增得到的细胞株。单克隆细胞株性状统一，传代过程中细胞的基因表达保持稳定。

实验流程：


客户提供：

A：目的基因信息；

B：载体构建详情。

*终交付：

A： 稳定转染细胞株，冻存的细胞1ml/支，细胞数量为2*106/ml；

B：详细实验报告单。

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