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成骨诱导
来源: | 作者:1 | 发布时间: 2025天前 | 1051 次浏览 | 🔊 点击朗读正文 ❚❚ ▶ | 分享到:
成骨诱导，是指来自植床周边宿主结缔组织中的可诱导成骨前体细胞，在诱导因子的作用下可被诱导定向产生骨原细胞、成骨细胞。

工作原理：

成骨诱导，是指来自植床周边宿主结缔组织中的可诱导成骨前体细胞，在诱导因子的作用下可被诱导定向产生骨原细胞、成骨细胞。
操作方法和步骤：
1.原代的MSCs分离后，置于37℃，5%CO2培养箱中培养，每2-3天换液或传代；
2.建议使用低代次的MSCs（<8代，随着传代后代次的增加，多向潜能的能力也逐渐降低）。当细胞融合度达到60-80%时，用0.25%Trypsin-EDTA进行消化进行传代。
3.收集细胞，按照5×103cells/cm2的细胞密度接种在预先用明胶包被的六孔板中，每孔培养基2 ml，37℃，5%CO2培养。
4.待细胞融合度达到60-70%，开始诱导，小心弃去培养基，并小心沿壁加入37℃预热的成骨诱导分化培养基；
5.每隔3天更换新鲜预热过成骨诱导分化培养基；
6.诱导2周后，为尽可能避免成骨细胞卷边，脱落，每3天全换液更换为每2天半量换液，直至诱导出现大量矿化结节。

成骨检测方法：

1.ALP活性检测；
2.茜素红染色（钙结节染色）。

客户提供：
1.成骨前体细胞；2.成骨诱导分化培养基。

*终交付：

实验原始数据和实验报告单。

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