实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR, qRT-PCR )
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发布时间: 2026天前
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实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。·
背景知识 :
实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。·
Real-time PCR是在PCR扩增过程中,通过荧光信号,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据。
样品准备条件:
细胞样品:液氮中速冻保存或速冻24 h后转入-80℃冰箱保存;或收集细胞后,根据细胞量,加入1-1.5 mL Trizol 溶解裂解细胞,再转入-80冰箱保存。
组织样品:动物组织标本立即放入液氮中速冻保存后可转入-80℃冰箱保存;特殊组织(植物等)建议采用新鲜组织即刻提取RNA,逆转合成cDNA后-20 ℃保存备用。
所有样品的处理和保存过程中,切忌反复冻融。
客户需提供 :
新鲜且足量的样品组织,细胞不少于106,或纯化好的符合实验要求的cDNA ,目的的基因信息 ,相关文献等。
*终交付:
实验报告单,qRT-PCR原始数据,扩增曲线,溶解曲线,数据分析结果等。