染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation, ChIP)
来源:
|
作者:3
|
发布时间: 1986天前
|
2284 次浏览
|
🔊 点击朗读正文
❚❚
▶
|
分享到:
染色质免疫共沉淀技术的原理是在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小 片段,然后通过免疫学方法沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋 白质与DNA相互作用的信息。
基本原理:
染色质免疫共沉淀技术的原理是在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小
片段,然后通过免疫学方法沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋 白质与DNA相互作用的信息。
一般流程:
甲醛处理细胞→收集细胞,超声破碎→加入目的蛋白的抗体,与靶蛋白-DNA复合物相互结合→加入Protein A,结合抗体-靶蛋白-DNA复合物,共沉淀→对沉淀下来的复合物进行清洗,除去一些非特异性结合→洗脱,得到富集的靶蛋白-DNA复合物→解交联,纯化富集的DNA-片断→PCR分析
应用
组蛋白的修饰研究;染色质表观遗传修饰研究;转录调控分析;药物开发研究;有丝分裂研究;DNA损伤与凋亡分析等。
客户需提供 :
细胞及相关调控关系基因名称。
*终交付:
原始实验数据,*终交付图等